iELisa玉米赤霉烯酮檢測試劑盒利用競爭性酶聯免疫反應原理,對玉米、麥類、豆類、大米等谷物和飼料中玉米赤霉烯酮的含量進行定量檢測。玉米赤霉烯酮是由鐮刀菌類的真菌形成,它是一種植物性激素,并具雌激素性特征。玉米赤霉烯酮具有較強的生殖毒性和致畸作用,可引發動物發生雌性激素亢進癥,導致動物不孕或流產,對家畜特別是豬、牛和羊的影響較大。中國標準規定:玉米、小麥中玉米赤霉烯酮不得超過60μg /kg,配合飼料、飼料原料玉米中玉米赤霉烯酮不得超過500μg /kg。
原理
測定的基礎是抗原-抗體反應。微孔板上包被有抗抗體。加入玉米赤霉烯酮(ZEN)標準品或樣品、酶標抗原和抗體后,游離的玉米赤霉烯酮與酶標抗原競爭結合抗體,抗體或抗體結合物與固定在微孔板上的抗抗體再結合,沒有結合的標準品、酶標抗原及抗體被洗去,加入TMB底物顯藍色,加入終止液后顏色由藍變黃,用酶標儀在450nm處檢測,吸光值與樣品中玉米赤霉烯酮含量成負相關,與標準曲線比較即可得出玉米赤霉烯酮的含量。
需要的儀器、試劑
1)儀器
酶標儀450nm(iELisa全自動酶標儀或相當者)
微量移液器:20μL-200μL單道,100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道
多功能旋轉混合器(或者搖床、高速均質器)
酶標板振蕩器
渦旋混合器
50mL離心管
1.5mL離心管
定性濾紙
過濾漏斗
天平:感量0.01g
試劑
樣品提取液70%甲醇:取700mL甲醇,加300mL純水,混勻。
純水(蒸餾水、去離子水)。